研究以天麻素和对羟基苯甲醇的总提取量为指标,分析多变量之间的交互作用,优化天麻中活性成分的超高压提取工艺。
1.仪器
Agilent1120高效液相色谱仪(包括二极管阵列检测器、二元泵、自动进样器,美国安捷伦科技有限公司);HPP.L3-600型超高压提取设备(天津市华泰森淼生物工程技术有限公司);Sartorius BSA124S型电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司);BU-CHI旋转蒸发仪(瑞士步琦有限公司)。
2.对照品溶液的制备
用赛多利斯电子天平精密称取天麻素和对羟基苯甲醇对照品各10mg,分别置于100mL容量瓶中,加入90%的乙腈水溶液溶解,并定容至刻度,摇匀,配成浓度为100μg·mL-1的对照品溶液,4℃保存。
3.供试品溶液的制备
天麻药材经干燥后,粉碎,过60目筛,用赛多利斯电子天平精密称取本品粉末1.00g,按预先设定的参数进行超高压提取。提取液经3800r/min离心7min后,取上清液,减压浓缩至约10mL,定容至10mL,得天麻供试品溶液。
4.结论
本研究采用单因素实验考察了乙醇浓度、料液比、提取压力和保压时间对天麻超高压提取的影响,之后采用Box-Behnken中心组合试验研究几种因素间的交互作用。根据分析结果,乙醇浓度、料液比、提取压力和保压时间对天麻中指标性成分的总提取量具有极显著影响;料液比和提取压力的交互作用对总提取量具有极显著影响;乙醇浓度和提取压力的交互作用对总提取量的影响显著。结合实际应用,终确定天麻的超高压提取工艺为乙醇浓度82%、料液比1:40,提取压力500MPa、保压时间4min。应用超高压技术提取天麻中有效成分具有高效、简便,耗能少的优点,可用于天麻及其制剂的质量控制过程中活性成分的提取。